Reactivo de Feulgen para la demostración de DNA


El líquido de Bouin no es recomendado como un agente de fijación para este método debido a que ocasiona una hidrólisis excesiva. La duración óptima del ácido varía con los agentes de fijación utilizados.

Desparafinar y transferir los extendidos enjuagados con agua agua destilada a:

  1. Solucion de HCl 1Normal a 60°C durante aproximadamente 10 minutos
  2. Colocar una sección de control en agua destilada a 60°C por la misma cantidad de tiempo.
  3. Lavar las secciones en agua destilada.
  4. Colocar en reactivo de Schiff a temperatura ambiente por 30–60 minutos.
  5. Enjuagar rápida y profundamente en agua destilada.
  6. Lavar en agua corriente.
  7. Teñir en solución acuosa de verde brillante al 1% durante 1 minuto.
  8. Deshidratar en alcohol, aclarar en xileno.
  9. Montar en un medio de resina sintética.

Resultados:

DNA: rojo; Citoplasma: verde.

Hígado, Feulgen y fast green. 400x, high dry. (a) nucleolo.

NOTA: La sección de control deberá ser negativa. Cualquier reacción positiva indica que hay presentes aldehidos libres antes de la hidrólisis.

Este método resulta particularmente útil para la demostración de linfocitos debido a la gran cantidad de DNA intracelular precente en estas condiciones.

Tiempos óptimos de hidrólisis luego de la fijación utilizando 1 N ácido clorhídrico a 60°C.: para tejidos fijados en formol 8 minutos, Helly 8 minutos, Susa 18 minutos yZenker 5 minutos.

H.T. A.V. Chertcoff

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